分子病理学技术之荧光原位杂交

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  分子病理学技术之荧光原位杂交 分子病理学是病理学的一个重要分支,其在疾病的诊断、靶向治疗及预后预测等方面的作用日益凸显。
  分子病理学技术主要包括三大类:
  1.荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH);
  2.测序技术(包括Sanger测序、二代测序等);
  3.基于PCR的技术(包括PCR、RT-PCR、实时定量PCR及数字PCR等)。
  虽然以上每一类技术都有其特定的检测特点及范围,但作为与病理形态学联系最为紧密的FISH技术,迄今为止,在淋巴瘤、白血病、乳腺癌、胃癌等疾病的临床应用中,依然无法替代。 FISH是一种基于核酸双链互补的原则,将荧光标记的核酸探针与细胞核内靶DNA进行杂交,通过荧光显微镜观察荧光信号来判断靶DNA数目和结构变化的技术。其基本原理是:核酸变性-退火-复性。
  该技术有很高的敏感性和特异性,可用于检测淋巴瘤、白血病及其它各种实体瘤细胞的染色体/基因数目和结构的变化,包括染色体易位、非整倍体变化,基因缺失、扩增等分子遗传学改变,为临床病理工作中疾病的诊断、分类、靶向治疗及预后预测提供准确的分子遗传学信息。
  对医院来说,FISH是分子检测领域技术和设备要求门槛最低的平台,只需一台杂交仪和一台荧光显微镜即可开展。不像PCR需要认证的实验室,也不像二代测序需要强大的数据分析能力。然而,"第三类体外诊断试剂管理条例"对于FISH探针的限定,曾经在一定程度上有碍这一技术的应用。
  近来,国家明文发布,对于非明确诊断意义或临床指导用药的体外诊断试剂,不再按第三类体外诊断试剂进行管理,这也就意味着许多FISH探针不再需要"第三类体外试剂"的报证即可在医院病理科应用,这对临床来说绝对是巨大的好消息! 目前除了HER2 及ALK等少数探针外,绝大部分探针均无需"三类证",这对于满足临床对FISH技术的迫切需求具有重大意义。
  分子病理诊断的高速发展也得益于国家的大力支持,从三、五年前无人知晓到现在的路人皆知,在国家的大力支持下,它必将为人民带来更大的福音。十九大也明确提出,分子(基因)检测将逐渐纳入医保范畴。 可以预见,不久的将来,FISH技术将会迎来一个巨大的发展空间,也会普及到全国各地的三级甚至二级医院!Are you ready ? 那么问题来了,如果一个科室没有开展FISH检测,也没有FISH经验,又想开展这一检测,该怎么办呢?
责任编辑: 希禾
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